Hyclone 199/EBSS

　　抗原修复用于甲醛固定的石蜡包埋组织切片。石蜡切片标本用甲醛固定，使得细胞内抗原形成醛键、 羧甲键而***闭了部分抗原决定簇， 同时蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽。所以要求在进行免疫组化染色时，需要行抗原修复或暴露，即将固定时分子之间所形成的交联破坏，而恢复抗原的原有空间形态。

　　酶***方法是常用的抗原修***法之一，常用 0.1%胰蛋白酶和 0.4%胃蛋白酶液。一般说来，胰蛋白酶***能力较胃蛋白酶弱，主要用于细胞内抗原的***，胃蛋白酶主要用于细胞间抗原的***。工作中要认真参照抗体说明书指示进行***酶的选择，这样针对性***，标记效果更理想。

　　操作说明：

　　胰蛋白酶使用前预热 37℃，切片也预热 37℃，***时间约为 5~30 分钟;胃蛋白酶*** 37℃时间为 30 分钟。适用于被固定遮避的抗原，其中有：collagen，complement，cytokeratin，c-erb-2，gfap，lca，ln 等。

　　胰蛋白酶处理

　　1、滴加一滴胰蛋白酶工作液于组织上。

　　2、室温或 37℃孵育 20-40 分钟，孵育时间的长短依福尔马林固定时间及所测抗原情况而定。

　　3、蒸馏水冲洗，终止反应。

　　4、阻断内源性***化物酶。

　　5、免疫组化染色。

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