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一、使用前准备与检查
罐体与管路完整性确认：
检查316L不锈钢罐体无划痕、焊缝无泄漏，快装卡箍密封圈完好；
传感器校准：
pH电极用标准缓冲液校准，DO探头执行零氧与饱和氧校准；
灭菌前装液规范：
培养基体积为罐容积的60–70%（如5L罐装3–3.5L），预留泡沫与通气空间。
二、灭菌操作关键步骤
冷空气排尽：
升温阶段打开排气阀，待蒸汽持续喷出1–2分钟后关闭，确保罐内无冷点；
灭菌参数达标：
121℃、0.12MPa（表压）维持≥30分钟，温度探头需置于冷点验证；
缓慢降压降温：
灭菌后自然冷却至＜80℃再通冷却水，防止负压吸瘪罐体或热冲击破裂。
三、接种与运行控制
无菌接种操作：
通过火焰保护或无菌接头快速注入种子液，避免长时间开盖；
参数设定匹配菌种需求：
如大肠杆菌：37℃、pH7.0、DO＞30%；酵母：30℃、pH5.5、低剪切搅拌；
联动控制启用：
开启pH自动补酸碱、DO联动调转速或通气量，避免手动干预引入误差。
四、取样与补料规范
无菌取样：
使用带隔膜阀的取样口，先弃去前端死体积，再收集有效样品；
补料防污染：
补料瓶需单独灭菌，管路经蒸汽或酒精消毒，流速由蠕动泵精确控制。
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